1989年王丽云从解放军艺术学院戏剧系毕业回到总政话剧团,一直担任团里的“女一号”,先后主演话剧,在《李大钊》里饰“赵纫兰”、《鱼水情》、《最危险的时候》、《马蹄声碎》等五部话剧,她以唯一全票荣获第十届“梅花奖”,成为军内唯一获该届“梅花奖”的女演员。1996年10月她又荣获中国话剧研究会5年一届的“金狮奖”。
2009年7月,在沈严、王雷联合执导的电视剧版《手机》中饰品桂花;随后,加盟了被称为民国版“金枝欲孽”,讲述了豪门宅院里的爱恨情仇的作品《大宅院的女人》,饰大太太林燕娇;同年,与温峥嵘、姚刚共同出演家庭伦理剧《非亲姐妹》,饰卢月、依旋的妈。
2010年1月,和张宁益配合都市情感剧《爱的方向盘》的拍摄,饰林达的母亲;5月,拍摄了沈好放执导的民生情感作品《夏妍的秋天》,饰演夏妍二舅妈;8月,与李光洁、王珞丹合作,在李路执导的电视剧版《山楂树之恋》中饰大妈;8月19日,与张译、曹炳琨共同主演了亲情伦理剧《掌门女婿》,饰张淑平。
2011年3月,与王茜华共同主演了女人情感励志戏《小麦进城》,饰婆婆杨文采;6月,搭档马伊琍、李晨主演杨文军执导的女性情感励志剧《风和日丽》,饰周楠;8月,与雷佳音、朱杰共同主演家庭伦理剧《婆婆来了》的姊妹篇《丈母娘来了》,饰王老师;同年,在跨越城乡鸿沟的家庭伦理剧《不要离开我》中饰段母。
2012年1月,加盟了王志军、金雷联合执导的亲情伦理喜剧《岳母的幸福生活》,饰岳母赵慧玲;4月,与曾黎、闫学晶共同主演了家庭版“甄嬛传”《妯娌的三国时代》,饰何家婆婆。
2013年2月,主演了农村女性励志戏《油菜花香》,饰婆婆,并凭此角色获得最佳女配角奖;4月,与蔡明、盖克领衔主演都市轻喜剧《老妈的三国时代》,饰孙丽琴;5月,拍摄了沈阳作家刘国强长篇小说《日本八路》改编的30集电视连续剧《烽火双雄》,饰芍药娘;7月,与陶红、杨议、阎娜共同主演了当代都市轻喜剧《我们家的微幸福生活》,饰方锦华。
2014年,与于晓光、车晓主要电视剧《满仓进城》,饰演满仓妈。